Prevalence of rickettsias in ticks (Acari: Ixodidae) collected in domestic animals of the northern region of Caldas department, Colombia / Prevalencia de rickettsias en garrapatas (Acari: Ixodidae) colectadas en animales domésticos del norte del departamento de Caldas, Colombia

ABSTRACT The northern region of the Caldas department in Colombia is considered an endemic area for murine typhus. Recent studies in patients with acute febrile disease demonstrated infection with the spotted fever group's rickettsiae due to an increase in the IgG titer by indirect immunofluorescence in paired sera obtained from these patients. The objective of the current research was to identify the species of ticks present in domestic animals in the northern region of Caldas and establish the presence of rickettsial genomic material in the collected ticks. Ticks were obtained from bovines, horses, and dogs in seven municipalities in the north of Caldas. Ticks were stored in 90 % ethanol until processing and were identified using taxonomic keys, DNA was extracted using commercial techniques, and the gltA gene was amplified by conventional chain reaction polymerase (PCR). Seven hundred thirteen ticks were obtained from 593 domestic animals. The highest infestation occurred in cattle, followed by canines and horses. Ticks found corresponded to the species Riphicephalus microplus, Dermacentor nitens, Amblyomma sp., and Riphicephalus sanguineus s.l. In none of the tick samples, Rickettsia-specific gltA gene DNA was found. It can be inferred that the ticks obtained are not a source of rickettsial infection for people in this department region, despite finding different species associated with the transmission of this disease.

RESUMEN La región norte del departamento de Caldas, Colombia es considerada como una zona endémica de tifo murino. Estudios recientes realizados en pacientes con enfermedad febril aguda, demostraron la infección con rickettsias, del grupo de las fiebres manchadas, debido al aumento en el título de IgG, por inmunofluorescencia indirecta (IFI), en sueros pareados, obtenidos de dichos pacientes. El objetivo de la investigación fue el de identificar las especies de garrapatas presentes en animales domésticos, de la región norte de Caldas y establecer la presencia de material genómico de rickettsias, en las garrapatas recolectadas. En siete municipios, se recolectaron garrapatas de bovinos, de equinos y de caninos. Las garrapatas, se almacenaron en etanol al 90 %, hasta su identificación taxonómica. Se extrajo el ADN, utilizando técnicas comerciales y se amplificó por reacción de cadena de la polimerasa (PCR) convencional el gen gltA. Se obtuvieron 713 garrapatas de 593 animales domésticos. La más alta infestación se presentó en bovinos, seguido de los caninos y equinos. Las garrapatas encontradas correspondieron a las especies Riphicephalus microplus, Dermacentor nitens, Amblyomma sp. y Riphicephalus sanguineus s.l. En ninguna de las muestras, se comprobó la presencia de ADN del gen gltA específico de Rickettsia. Se puede inferir que las garrapatas obtenidas no serían una fuente de infección rickettsial para las personas, en esta región del departamento; sin embargo, su presencia es un factor de riesgo para la adquisición de rickettsiosis asociadas con las fiebres manchadas.

Mecanismos de resistencia a fluconazol expresados por Candida glabrata: una situación para considerar en la terapéutica / Resistance mechanisms to fluconazole expressed by Candida glabrata: a situation to consider in therapy / Mecanismos de resistência a fluconazol expressos por Candida glabrata: uma situação a considerar na terapêutica

Introducción: Los esfuerzos terapéuticos orientados a atender las micosis por Candidaspp. se han enfocado en el empleo de azoles; sin embargo, en la literatura científica se discute su beneficio, por los amplios y descritos mecanismos de resistencia. Objetivo: Describir los mecanismos de resistencia al fluconazol expresados por la especie Candida glabrata, con la intención de que sean considerados dentro de las variables de elegibilidad para la intervención. Método: Se realizó una revisión integrativa utilizando la pregunta orientadora: ¿cuáles son los mecanismos de resistencia al fluconazol expresados por la especie Candida glabrata? Veintinueve estudios obtenidos de la base de datos PubMed cumplieron los criterios del análisis crítico propuesto por el instrumento PRISMA, utilizado para la selección de los artículos incluidos para su revisión en este manuscrito. Las categorías bajo las cuales se organizaron los elementos de análisis fueron: sobrexpresión de bombas de eflujo y modificaciones en la enzima lanosterol 14-alfa-desmetilasa. Resultados: Los mecanismos de resistencia al fluconazol expresados por Candida glabrata están determinados principalmente por la regulación a la alza de bombas de adenosina-trifosfato Binding Cassette (ABC) y por la modificación del punto de unión con su blanco farmacológico: la enzima lanosterol 14-alfa-desmetilasa. Conclusión: Los mecanismos de resistencia expresados por Candida glabrata se asocian con la modificación estructural de la diana farmacológica y la sobreexpresión de bombas de eflujo de manera diferencial a otras especies. Se sugiere que Candida glabrata es intrínsecamente menos susceptible al fluconazol.

Introduction: Therapeutic efforts aimed at treating mycosis caused by Candida spp. have focused on the use of azoles; however, their benefits have been subject to discussion in scientific literature, due to the extensive and well-described resistance mechanisms. Objective: To describe the resistance mechanisms to fluconazole expressed by the Candida glabrata species, so they are considered within the variables of eligibility for intervention. Method: An integrative review was carried out using the guiding question: what are the fluconazole resistance mechanisms expressed by the Candida glabrata species? Twenty-nine studies obtained from the PubMed database met the criteria for the critical analysis proposed by the PRISMA instrument, which was used for the selection of articles for review included in this paper. The analysis elements were organized in the following categories: overexpression of efflux pumps and modifications in the enzyme lanosterol 14-alpha-demethylase. Results: The resistance mechanisms to fluconazole expressed by Candida glabrata are mainly determined by the upregulation of Adenosine triphosphate Binding Cassette (ABC) pumps and by the modification of the point of attachment with its pharmacological target: the enzyme lanosterol 14-alpha-demethylase. Conclusion: The resistance mechanisms expressed by Candida glabrata are associated with the structural modification of the pharmacological target and the overexpression of efflux pumps, in a way different to other species. It is suggested that Candida glabrata is intrinsically less susceptible to fluconazole.

Introdução: Os esforços terapêuticos voltados ao tratamento de micose por Candida spp. se focaram no uso de azóis; no entanto, na literatura científica discute-se seu benefício devido aos extensos e descritos mecanismos de resistência. Objetivo: Descrever os mecanismos de resistência ao fluconazol expressos pela espécie Candida glabrata, com a intenção de serem considerados dentro das variáveis de elegibilidade para a intervenção. Método: Uma revisão integrativa foi realizada utilizando a questão norteadora: quais os mecanismos de resistência ao fluconazol expressos pela espécie Candida glabrata? Vinte e nove estudos obtidos da base de dados PubMed atenderam os critérios de análise crítica proposta pelo instrumento PRISMA, utilizado para a seleção dos artigos incluídos para revisão neste manuscrito. As categorias sob as quais se organizaram os elementos de análise foram: superexpressão de bombas de efluxo e modificações na enzima lanosterol 14-alfa-desmetilase. Resultados: Os mecanismos de resistência ao fluconazol expressos por Candida glabrata são determinados principalmente pela regulação positiva das bombas de adenosina-trifosfato Binding Cassette (ABC) e pela modificação do ponto de fixação com seu alvo farmacológico: a enzima lanosterol 14-alfa-desmetilasa. Conclusão: Os mecanismos de resistência expressos por Candida glabrata são associados à modificação estrutural da Diana farmacológica e a superexpressão de bombas de efluxo de maneira diferencial a outras espécies. Sugere-se que Candida glabrata é intrinsecamente menos susceptível ao fluconazol.

Identificación de Candida glabrata y otras especies comunes del género Candida mediante el uso secuencial del medio de cultivo cromógeno y la prueba del tubo germinal / Identification of Candida glabrata and other common Candida species using chromogenic agar and germ tube test / Identificação de Candida glabrata e outras espécies comuns do gênero Candida mediante o uso sequencial do meio de cultivo cromogênico e a prova do tubo germinal

Introdución: se han usado agar cromógeno (AC) y la prueba del tubo germinal (PTG) para identificar C. albicans. Sin embargo, ninguna de estas dos pruebas por separado permite la identificación de C. glabrata. Objetivo: analizar la eficacia diagnóstica del uso secuencial del AC y la PTG para identificar las especies más comunes de Candida. Métodos: se identificaron 436 aislamientos usando el AC y luego la PTG; se utilizaron las pruebas bioquímicas como estándar de oro, y se determinaron la sensibilidad y especificidad del esquema secuencial con sus intervalos de confianza. Resultados: el uso en serie del AC y la PTG tuvo sensibilidad del 97,9 % (IC95 %: 96,0-99,9) para identificar C. albicans/dubliniensis y del 90,9 % (IC95 %: 84,0-97,8) para identificar C. tropicalis, con especificidad del 100 % para ambas especies. El mismo esquema permitió identificar C. glabrata con sensibilidad del 92,5 % (IC95 %: 86,2- 98,8) y especificidad del 96,6 % (IC95 %: 95,0-98,6), y el complejo C. parapsilosis con especificidad del 96,3 % (IC95 %: 94,5-98,1). Conclusiones: el esquema propuesto permite la identificación de C. albicans/dubliniensis, C. tropicalis y C. glabrata con sensibilidad y especificidad adecuadas, y podría ser útil en entornos clínicos de bajos recursos.

Introduction: Chromogenic agar and germ tube test have been used for decades to identify C. albicans. However, neither of these tests separately allows identification of C. glabrata. Objective: To test the efficacy of chromogenic agar and germ tube test used serially to identify the most common Candida species found in clinical practice, with emphasis on C. glabrata. Methods: 436 isolates were identified using the chromogenic medium followed by the germ tube test. Biochemical tests were used as gold standard. Sensitivity, specificity and confidence intervals (95 %) of the serial identification system were determined. Results: Sensitivity was 97.9 % (IC95 %: 96.0-99.9) to identify C. albicans/dubliniensis, and 90.9 % (IC95 %: 84.0-97.8) for C. tropicalis; specificity was 100 % for both species. Sensitivity was 92.5 % (IC95 %: 86.2-98.8) for identification of C. glabrata with 96.6 % (IC95 %: 95.0-98.6) specificity. Concerning identification of the C. parapsilosis complex, specificity was 96.3 % (IC95 %: 94.5-98.1). Conclusion: The proposed serial scheme has adequate sensitivity and specificity for identification of C. albicans/dubliniensis, C. tropicalis and C. glabrata. It could be useful in low-resources clinical settings.

Se usaram agar cromogênico (AC) e a prova do tubo germinal (PTG) para identificar C. albicans. No entanto, nenhuma destas duas provas por separado permite a identificação de C. glabrata. Objetivo: analisar a eficácia diagnóstica do uso sequencial do AC e a PTG para identificar as espécies mais comuns de Candida. Métodos: identificaram-se 436 isolamentos usando o AC e depois a PTG; utilizaram-se as provas bioquímicas como padrão de ouro, e se determinaram a sensibilidade e especificidade do esquema sequencial com seus intervalos de confiança. Resultados: o uso em série do AC e a PTG teve sensibilidade de 97,9 % (IC95 %: 96,0-99,9) para identificar C. albicans/dubliniensis e de 90,9 % (IC95 %: 84,0-97,8) para identificar C. tropicalis, com especificidade de 100 % para ambas espécies. O mesmo esquema permitiu identificar C. glabrata com sensibilidade de 92,5 % (IC95 %: 86,2- 98,8) e especificidade de 96,6 % (IC95 %: 95,0-98,6), e o complexo C. parapsilose com especificidade de 96,3 % (IC95 %: 94,5-98,1). Conclusões: o esquema proposto permite a identificação de C. albicans/dubliniensis, C. tropicalis e C. glabrata com sensibilidade e especificidade adequadas, e poderia ser útil em meios clínicos de baixos recursos.

Especies vegetaees investigadas por sus propieddes antimicrobianas, inmunomoduuladoras e hipoglicemiantes en el departamento de caldas (Colombia, sudamérica) / Veetal species sstudied by their antimicrobial, immunomodulatory and hypoglicemic properties in caldas-Colombia, south mmerica

El uso de plantas con fines terapéuticos en la atención primaria en salud, es una práctica común en la zona del Eje Cafetero colombiano. Nuestra Línea de Investigación ha realizado varios estudios etnofarmacológicos en esta zona, seleccionando algunas especies vegetales para evaluar la posible actividad antibacteriana, hipoglicemiante e inmunomoduladora. El presente trabajo describe las nueve especies estudiadas, con una breve descripción botánica, nombres comunes, usos empíricos tradicionales, fitoquímica y enfatizando en la actividad biológica hallada en la literatura o encontrada por nosotros. Los hallazgos de esta revisión muestran que -en nuestro medio- el uso medicinal de plantas es una práctica habitual, con varias indicaciones para una misma especie vegetal (muchas de ellas no validadas científicamente), no siempre coinciden los usos en diferentes regiones de ancestro étnico o cultural común y menos aún en las más dispersas; a veces el resultado experimental no valida la indicación terapéutica tradicional y empírica, pero antes de declarar dicha indicación como inválida, deben hacerse varios ensayos preclínicos y clínicos indagando eficacia y seguridad. Debido a la enorme biodiversidad de la flora colombiana se pensaría que existe una amplia investigación en su farmacología y fitoquímica, pero la realidad es que existen pocas especies que se hayan validado mediante estudios químicos y biológicos; por ello, son muy bajos el aprovechamiento medicinal más generalizado y la explotación económica de dicha flora. En nuestro país solo unas pocas universidades estimulan las investigaciones en este campo y no se observa apoyo de la industria farmacéutica o de otras entidades gubernamentales o privadas. Por razones políticas y culturales, las comunidades indígenas se muestran renuentes a compartir sus conocimientos ancestrales etnofarmacológicos empíricos con otros grupos sociales. Cinco especies mostraron una promisoria actividad inmunoestimulante, aumentando el recuento leucocitario: Alternanthera williamsii (Standley) Standley var. purpurea, familia Amaranthaceae, Ludwigia polygonoides H.B.K., familia Onagraceae, Phenax rugosus (Poir.) Wedd, familia Urticaceae, Solanum dolichosepalum Bitter, familia Solanaceae y Tabebuia chrysantha (Jacq) Nichols, familia Bignoniaceae; cinco plantas: Alternanthera williamsii (Standley) Standley var. purpurea, Ludwigia polygonoides H.B.K., Austroeupatorium inulaefolium (H.B.K.) R. M. King & H. Rob., Senna reticulata (Willd) H. Irwin y Solanum dolichosepalum Bitter, tienen algún efecto antibacteriano importante particularmente sobre Staphylococcus aureus, Escherichia coli y Pseudomona aeruginosa.

The use of medicinal herbage plants with therapeutic purposes in the primary health careattention of the health, is a frequent practice in the Colombian coffee zonetriangle. Our research line group has done carried out some ethnopharmacologic studies in this zone, selecting some vegetal species to evaluate the possible antimicrobial, immunomodulating and hypoglycemic activity. The present review describes the nine species studied, with a short brief botanic description, common names, traditional empiric uses, phytochemistry, and emphasizing in on the biological activity found in the literature or in our assaysresearch. The findings of this review establish that, in this region environment, the medical use of plants is a habitual usual practice, with different indications for a the same vegetal species (a lot of them do notnot even validated scientifically), not always match the uses in different regions of common ethnic or culture cultural common ancestry not always match and even less in dispersewhen there are different ancestry regions; sometimes the experimental result does not validate the tradicional and empiric therapeutic indication but before to stablishestablishing such this indication as invalid, several pre-clinic and clinic trials must be carried out in order toshould be done some preclinical and clinical assays to search for the efficacy and safety. Due to the enormous biodiversity of Colombian flora it would be thought that there is have an extensive research about their its pharmacology and phytochemistry, but really there are a very few species validated by chemical and biological studies.; forFor this reason, there are very low medical and economic exploitation of this flora. In our country only a few Universities promote the research in this field and have not support of the pharmaceutical industry or of the government or private agencies is not observed. By Because of political and cultural reasons, the Indian indigenous communities are reluctant to share his their ancestral empiric ethnopharmacologic knowledgment knowledge with other social groups. Five species shown showed promissory immunostimulant activity by increasing leukocyte counts:. Alternanthera williamsii (Standley) Standley var. purpurea, Amaranthaceae family, Ludwigia polygonoides H.B.K., Onagraceae family, Phenax rugosus (Poir.) Wedd, Urticaceae family, Solanum dolichosepalum Bitter, Solanaceae family and Tabebuia chrysantha (Jacq) Nichols, Bignoniaceae family; five species: Alternanthera williamsii (Standley) Standley var. purpurea, Ludwigia polygonoides H.B.K., Austroeupatorium inulaefolium (H.B.K.) R. M. King & H. Rob., Senna reticulata (Willd) H. Irwin and Solanum dolichosepalum Bitter, have some important antibacterial effect on Staphylococcus aureus, Escherichia coli y Pseudomona aeruginosa.

Sensibilidad aniimicótica de diferentes especie de hongos aislados de pacientees con micosis ungueal en la ciudad de manizales (caldas, Colombia) / Antimycotic sesiitivity of different isolated fungi species in patients with the onychomycosis in manizales-caldas-Colombia

La micosis ungueal es la principal causa de lesión ungueal y afecta entre el 2,5 y el14% de la población; la elección del tratamiento se basa principalmente en la identificación del agente causal por cultivo; la enfermedad tiene una alta tasa de resistencia y recurrencia terapéutica definidas como falta de aclaramiento de al menos el 25% de la uña o al aislamiento del hongo, determinable solo hasta el final del tratamiento o meses después. La prueba de sensibilidad antifúngica no se ha establecido como un método rutinario de laboratorio, su implementación podría reducir los riesgos de toxicidad por medicamentos innecesariamente instaurados, elevar la tasa de respuesta al tratamiento, medir la tasa de resistencia de los hongos a los antifúngicos disponibles, utilizar antimicóticos frente a los cuales sí haya sensibilidad por parte del agente micótico y reducir costos de terapia. Objetivo: Determinar la sensibilidad in vitro de tres fármacos antifúngicos en los agentes etiológicos aislados de lesiones micóticas ungueales. Tipo de estudio: Descriptivo. Población de referencia: Adultos con diagnóstico clínico de micosis ungueal de la ciudad de Manizales (Caldas, Colombia) de quienes se aislaron diferentes especies de agentes micóticos. Materiales y Métodos: Para la realización de los ensayos con los antifúngicos se emplearon los métodos propuestos por el CLSI en los protocolos M27-A2 y M27-S3 para levaduras y el M38-A2 para hongos miceliales. Se hizo análisis estadístico mediante el programa SPSS, aplicando el test de Student para el análisis de frecuencias y pruebas no paramétricas para el análisis de los resultados obtenidos con los antifúngicos. Resultados obtenidos: Los dermatofitos (T. rubrum, T. mentagrophytes y T. tonsurans) mostraron mayor sensibilidad a terbinafina e itraconazol con MIC50 de 0,0156 ug/ml y 0,0625 ug/ml, respectivamente. Las levaduras y hongos miceliales no dermatofitos tuvieron elevadas concentraciones inhibitorias mínimas para los tres fármacos. La mayor tasa de resistencia in vitro (fluconazol 100%, terbinafina 25%, itraconazol 67%) se observó en el grupo de los hongos miceliales no dermatofitos (Fusarium spp., Penicillium spp., Helmintosporium spp., Aspergillus spp., Acremonium spp. y Scopulariopsis spp.). Conclusiones: Aunque no existen hasta la fecha puntos de corte aplicables a la práctica clínica, ni es clara la correlación de los resultados con el desenlace clínico, la estandarización del test de sensibilidad antifúngica in vitro abre la posibilidad de hacer comparaciones con otros estudios y vigilancia de resistencias emergentes.

The onychomycosis is the main cause of nail injury and affects between 2.5 and 14% of the population; the election of treatment is based primarily on the identification of the causative agent by culture. The disease has a high rate of recurrence and therapeutic resistance defined by lack of clearance of at least 25% of the nail or the isolation of fungus, determinable only until the end of treatment or months later. Antifungal susceptibility testing has not been established as a routine laboratory method; its implementation could reduce the risk of drug toxicity by unnecessary administration, raise the rate of response to treatment, measure the rate of resistance of fungi to antifungal agents available, use of antifungal against which there is sensitivity by the mycotic agent and reduce costs. Objective: To determine the in vitro susceptibility of three antifungal drugs in etiologic agents isolated from fungal nail lesions. Study type: Descriptive. Reference population: Adults with a clinical diagnosis of nail mycosis in the city of Manizales, Caldas, Colombia from whom different species of mycotic agents were isolated. Materials and Methods: To perform tests with antifungal agents, the methods proposed by the CLSI in the M27-A2 and M27-S3 protocols for yeasts and M38-A2 for mycelial fungi were used. The statistical analysis was done using the SPSS program, applying Student's test for frequency analysis and non-parametric tests for the results obtained with antifungals. Results: The dermatophytes (T. rubrum, T. mentagrophytes and T. tonsurans) showed increased sensitivity to terbinafine and itraconazole with MIC50 of 0.0156 mg/ml and 0.0625 mg/ml respectively. Yeasts and no dermatophytes mycelial fungi had elevated MICs for all three drugs. The highest rate of resistance in vitro (fluconazole 100%, terbinafine 25%, itraconazole 67%) was observed in the group of non-dermatophyte filamentous fungi (Fusarium spp., Penicillium spp., Helminthosporium spp., Aspergillus spp., Scopulariopsis spp. and Acremonium spp.). Conclusions: Although to date breakpoints applicable to clinical practice do not exist and clear correlation of the results with the clinical outcome is not clear either, the standardization of the antifungal susceptibility test in vitro opens the possibility to make comparisons with other studies and surveillance of emerging resistance.